实验桌擦干净了，手套戴好了，培养基却可能『自带户口本』——里面藏着杂菌。怎么办？最经典的办法：扔进高压锅一样的灭菌锅，用121°C的饱和蒸汽彻底『煮透』。

上页我们用高压蒸汽把培养基灭得干干净净——但有些东西进不了高压锅：玻璃瓶、培养皿、粉末、油脂一旦沾水就报废。它们也要无菌，怎么办？

干热灭菌用的是烤箱慢慢烤。实验室还有更'暴力'的方式——把金属小钩子伸进酒精灯火焰里烧几秒。这就是灼烧灭菌，灭菌界的'绝杀'。

上一步我们把所有杂菌杀干净、把所有器具和培养基都备好了。现在把目标微生物接种进去，让它在培养基里繁殖——最后得到的这一整份，就是“培养物”。

上一页我们讲了培养物的概念——让微生物在人工条件下生长繁殖。但培养物一旦混进其他微生物，实验就乱了。怎么解决？

上页看到的纯培养物是结果——平板上一颗颗独立菌落。这页回到过程：自然或工业样本中常混有几十种微生物，纯培养要做的，就是把目标菌「单独挑出来」，并保证后续菌群都源自同一祖先细胞。

平板划线法：定义、要点与典型应用

划线法已经能把混菌拉开成单菌落，但没法回答「原来一共有多少菌」。要从一大堆菌里稀释到能数清的程度，这就是稀释涂布平板法。

前几页我们把杂菌杀干净，又学会了分离单菌落。但想养好微生物，光有碳源和水还不够——培养基里还差一层「矿物质的底料」，这就是无机盐。

稀释涂布平板法那一步我们提到，培养基表面会长出肉眼可见的"小点"——这些小点到底是什么？它们从何而来，又透露了哪些信息？

上次我们学会了怎么赶走杂菌、拿到纯培养物——但光有干净的环境还不够，微生物住进来后吃什么？这就要请出「培养基」了。

• ✓灭菌方法必须匹配对象——接种环灼烧、玻璃干热、培养基湿热
• ✓纯培养是技术过程，纯培养物是结果状态，两者不可互换
• ✓划线法逐步稀释求「纯」，涂布法梯度稀释求「数」
• ✓培养基中无机盐量微却必需，缺失则酶失活、生长停滞
• ✓菌落形态是纯培养验证与菌种初步鉴定的首要线索

三个问题先独立琢磨一阵，再翻参考答案看思路。