动物细胞工程(一)
看清动物细胞培养、融合与核移植的原理、操作步骤和适用边界
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动物细胞工程(一)
看清动物细胞培养、融合与核移植的原理、操作步骤和适用边界
动物细胞培养流程设计与操
厨师做菜要选食材、控火候、保卫生,细胞培养在体外重现这套逻辑——取材、控环境、防污染,每一步都不能省。
水对应培养基、温度对应37℃、氧气对应CO₂控pH、换水分瓶对应传代
无菌操作与污染控制
无菌操作与污染控制:定义、要点与典型应用
组织消化/分散制备单细胞
组织消化/分散制备单细胞悬液:定义、要点与典型应用
传代与分瓶培养操作
上一页我们把组织消化成单细胞悬液。但细胞装在瓶子里会越养越挤——什么时候该换大房子?换几套?这就是传代与分瓶要解决的事。
住满就搬(传代),一套变多套(比例),住松快了细胞才好长
动物细胞工程
你已经会培养动物细胞了——这只是动物细胞工程的敲门砖。真正让这门学科站住脚的,是培养之上"融合、改写、重编程"这一整套细胞改造技术。
原料是动物细胞,设备有培养罐、融合仪、显微操作台,产出抗体、疫苗、克隆动物
动物细胞培养
动物细胞培养:定义、要点与典型应用
合成培养基
上一页我们用培养基养细胞,但你有没有想过——这瓶橙黄色液体里到底装着什么?早期养细胞其实用的是动物自身体液,效果不可控,于是科学家开始自己「配」。
配方奶粉把每种营养精确到 mg,鲜牛奶天然但批次波动大——这正是科学家从天然走向合成培养基的动机
血清(培养添加物)
合成培养基解决了糖、氨基酸、无机盐、维生素的来源,但真正养过细胞的人都知道:少了血清这一勺,细胞就是不贴壁、不增殖。为什么基础配方还缺这一口?
成分复杂、营养丰富却说不清配方,不同批次味道还不一样
培养液(液体培养基)
前两页我们分别看过合成培养基和血清——真正送到细胞面前的,是把它们按比例调好的「培养液」。它不是单一化学品,而是一整套配方。
基础电解质(合成培养基)+ 营养添加(血清)+ pH 缓冲——都把外液调到生理窗口
无菌、无毒环境(动物细胞
上一页讲了无菌操作——那是「动作」层面。这一页要看的是「环境」本身:动物细胞对环境有多挑剔?
温度≈体温监控,气体≈呼吸机,酸碱≈血液平衡——任何偏差都可能致命
温度、pH和渗透压(动物细
温度、pH和渗透压(动物细胞培养条件):定义、要点与典型应用
气体环境(动物细胞培养条
上一页讲 pH 要稳定在 7.2~7.4,但培养液放几小时就偏酸——靠什么实时纠偏?答案就藏在培养箱顶上那根气管里:CO2 在暗中与碳酸氢盐配合,把 pH 锚定住。
增氧泵补 O2≈培养箱供 O2 给细胞呼吸;CO2 与水碱度平衡 pH≈CO2 与 HCO3- 缓冲稳定培养基 pH
本节要点
串联本节知识点,给出记忆锚点与易错提醒
课后思考
先自己思考,再对照参考答案。开放题没有唯一标准答案。
参考答案血清提供生长因子、激素、贴壁因子(如纤连蛋白)、脂质及某些未知微量组分。其中部分痕量因子至今未被鉴定,合成培养基暂无法完全替代。
参考答案不能。37℃下葡萄糖降解、谷氨酰胺分解、pH漂移、抗生素失活,且微生物极易滋生。培养液应4℃避光保存,开封后一般不超过两周。
参考答案动物细胞增殖慢、无自身抵抗力,培养周期长达数天,期间任何一次微量污染都会被时间放大;而微生物培养几小时就能见结果,发现更早。